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DuGreen nucleic acid gel stain 10000× in water (效果同GelGreen)

  • 商品编号:011
  • 销 售 价:¥580.00
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详细说明书

产品参数

Name DuGreen nucleic acid gel stain 10000× in water (效果同GelGreen)
CAT#011CAS#N/A
StorageDesiccated dark freezerShelf Life24 months
Ex (nm)471Em (nm)540
MWN/ASolventDMSO/H2O

产品介绍

DuGreen 核酸染料(10,000× 水溶液)

  DuGreen 核酸染料特点

  ● 无毒性:DuGreen 独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内,艾姆斯氏试验

  结果也表明,该染料的诱变性远小于EB。

  ● 灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。

  ● 稳定性高:适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定,耐光性强。

  ● 信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。

  ● 操作简单:在预制胶和电泳过程中染料不降解;而电泳后染色过程也只需 30 分钟且无需脱色或冲洗 ,即可直接用可见光凝胶透射仪观察。

  ● 适用范围广:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。

  ● 与标准凝胶成像系统以及可见光激发的凝胶观察装置完美兼容:适用于使用254nm 激发的紫外凝胶成像系统或可见光激发的凝胶观察装置。

  DuGreen 使用方法简介

  1.胶染法(用法同EB)(推荐方法)

  (1) 制胶时加入DuGreen 核酸染料。(例如:每50mL 琼脂糖溶液中加入5μL DuGreen 10,000× 储液,以此比例类推)。

  (2) 按照常规方法进行电泳。

  注意事项:

  (1) 此方法染色染料用量相对较少。500 μL染料大约可以做100块 50mL的胶。

  (2) 由于DuGreen 具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将DuGreen 储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。DuGreen 兼容所有常用的电泳缓冲溶液。

  (3) 如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度;选用更长的凝胶;延长凝胶时间以保证边缘清晰;改进上样技巧或选择泡染法染色。

  (4) 此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。

  2.泡染法

  (1) 按照常规方法进行电泳。

  (2) 用H2O将DuGreen 10,000× 储液稀释约3,300倍到0.1M NaCl中,制成3× 染色液。(例如将15μL DuGreen 10,000× 储液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。

  (3) 将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中。缓慢加入足量的3× 染色液浸没凝胶。室温振荡染色30min左右。

  注意事项:

  (1) 用泡染法染色时,染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右。

  (2) 3× DuGreen 染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。

几种核酸染料比较

名称

灵敏度

稳定性

DNA迁移的影响

安全性

适用性

DuRed

条带不易弯曲,片段不易迁移

独特油性大分子,不挥发升华,不易吸入人体,不能穿透细胞膜进入活细胞,安全无毒。艾姆斯氏测试结果表明, DuRed在凝胶染色浓度下完全没有诱变性,因此完全没有致癌毒性!

通用大小片段电泳染色,与EB有相同的光谱特性,无需改变滤光片及观察装置。标准的EB滤光片或SYBR滤光片都适用,普通紫外凝胶透射仪观察即可,在300nm紫外光附近可得到最佳激发。

DuGreen

条带不易弯曲

片段不易迁移

独特油性大分子,不挥发升华,不易吸入人体,不能穿透细胞膜进入活细胞,安全无毒。艾姆斯氏测试结果表明,DuGreen在凝胶染色浓度下完全没有诱变性,因此完全没有致癌毒性!

通用大小片段电泳染色,适用于使用254nm激发的紫外凝胶透射仪或可见光凝胶透射仪观察。

Sybr Green I

染料浓度高时,条带容易弯曲,迁移现象明显

属花箐染料,能透过细胞膜进入活体细胞内,但容易生物降解,不会在体内残留,安全无毒。

100bp以上电泳染色,适用于使用254nm激发的紫外凝胶透射仪或可见光凝胶透射仪观察。

EB

条带不易弯曲,片段不易迁移

分子量小,易挥发升华,易吸入人体,不易生物降解,在体内长期残留。艾姆斯氏测试结果表明,EB容易引起有机体突变,是强诱变剂,高致癌性。

100bp以上电泳染色,背景荧光信号高;使用普通紫外凝胶透射仪观察。

Goldview 

条带不易弯曲,片段不易迁移

成分为吖啶橙,煤焦油提取物,有高毒,致癌,高诱变性。易挥发升华,易吸入人体,能进入活体细胞内,不易生物降解,在体内长期残留。

100bp以上电泳染色,背景荧光信号高;适用于254nm激发的紫外凝胶透射仪或可见光凝胶透射仪观察。

  特别提醒:

  (1) 如果您使用的是紫外成像仪,请选择DuRed;如果您使用激光成像仪或希望在可见光下观测,请选择 DuGreen。

  (2) 少数情况下,质粒经某些酶切后的DNA样品会出现拖尾和分辨率降低,建议同时尝试两种染色方法以决定哪种方法更加合适。